摘要：目的：探索补肾益智方（BSYZ）治疗阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease, AD）的药效物质基础及其作用机制。方法：采用网络药理学理论与方法，首先从中草药相关数据库中收集BSYZ 化学成分，以药代动力学参数（吸收、分布、代谢、排泄、毒性）为条件筛选出候选活性成分，然后基于三维形状匹配的WEGA 程序对筛选出的候选活性成分进行靶标预测，基于靶标预测的结果构建药物- 靶标网络并进行网络分析以及KEGG 通路富集分析。同时采用APP/PS1 双转基因小鼠模型验证BSYZ 的体内药效并在网络药理学预测结果指导下进行体内分子机制的相关验证，从而全面深入地揭示BSYZ 治疗AD 的药效物质基础及作用机制。结果：BSYZ 共有276 个化学成分，其中17 个关键化合物发挥主要治疗作用，包括Eriodictyol，Vitamin c 以及Physcione 等。BSYZ 可作用于156 个靶标，其中ACHE（acetylcholinesterase）、SIGMAR1（sigma non-opioid intracellular receptor 1）、SLC6A4（sodium-dependent serotonin transporter）、CHRNA7（neuronal acetylcholine receptor subunit alpha-7）以及NOS1（nitric oxide synthase，brain）是BSYZ 治疗AD发挥疗效的主要作用靶点。网络分析可知，蛇床子、人参、枸杞子/ 女贞子在BSYZ 治疗AD 中通过同时作用于相同的蛋白靶标而发挥协同增强作用。通路富集分析可知，BSYZ 主要作用于两大AD 相关的病理网络：一方面BSYZ 作用于导致AD 的上游病理通路，抑制Aβ以及NFTs 生成，发挥阻止疾病进展的作用；另一方面作用于缓解AD 疾病症状的下游靶点，调节神经营养因子生存以及调节长时程增强效应，提高BSYZ 治疗AD 的综合疗效。动物行为学结果表明BSYZ 中高剂量组可改善APP/PS1 小鼠的学习记忆能力，包括显著缩短逃避潜伏期、显著增加穿越平台的次数等。尼氏染色结果表明BSYZ 可减少APP/PS1 小鼠海马中Aβ以及老年斑。Western Blot 实验表明，BSYZ 中高剂量组通过显著下调APH1B（gamma-secretase subunit APH-1B）水平，上调IDE（insulin-degrading enzyme）以及NEP（neprilysin）水平等途径从而减少Aβ在APP/PS1 小鼠中的生成聚集。同时Western Blot 实验还表明，BSYZ 高剂量组可减少活化型Caspase-3 与Caspzse-8 含量，说明BSYZ 具有神经保护作用。结论：本研究从网络多靶标的角度阐明了BSYZ 治疗AD 的药效物质基础及作用机制，为中药复方的网络药理学研究提供方法学参考。