摘要： 目的：AD 基本病理可见老年斑（senile plaques，SP）与神经原纤维缠结（neurofi brillary tangles，NFT）等病变，老年斑又称淀粉样斑，主要由细胞外纤维和β淀粉样蛋白（β-amyloid protein，Aβ）形成沉淀引起。秀丽隐杆线虫结构简单，繁殖迅速，是一种优秀的疾病筛选模型。CL4176（myo-3/human Aβ1-42）线虫模型通过激动myo-3 体壁特异性肌球蛋白启动子，将人源Aβ1-42 在体壁肌细胞中表达，当线虫中Aβ表达到一定程度，就会诱导线虫出现瘫痪直至死亡。实验利用 CL4176 线虫表达Aβ，出现瘫痪模型，将若干天然产物给予到瘫痪模型的线虫上，筛选具有延缓线虫瘫痪，降解Aβ沉积，从而对阿尔茨海默病具有治疗作用的天然产物或先导化合物。方法：取出CL4176 线虫株，解冻，待虫体自然沉降后，弃大部分上清液，其余底液铺到新鲜的含OP50 的NGM平板上，置于16℃培养箱中培养复苏线虫株。将离心管置于冰上10 min，使线虫沉于管底，1 800 转离心10 min。去掉大部分上清液，收集L1 期同步化线虫，将收集的同步化线虫转移到给药板上，置于16℃、湿度60 条件下培养。在16℃下培养约48 h，幼虫发育至L3 期，立即升温至25℃条件下培养。升温后第24 h，开始观察记录瘫痪行为，每2 h 观察记录一次瘫痪的时间和数量，直至所有线虫全部瘫痪。用worrm picker 接触线虫头部或躯干，若线虫仅能移动头部或者全身瘫痪，则判定为线虫处于瘫痪状态，未瘫痪线虫判断为存活线虫。受试品孵育培养线虫，分别设置溶媒对照组、受试品孵育处理组。显微镜下观察观察线虫瘫痪行为，记录瘫痪的时间和数量，直至所有线虫全部瘫痪死亡。统计每个小板瘫痪的线虫数和线虫总数，计算平均瘫痪时间PT50。结果：与溶媒对照组对比PT50值分别为：GAS-31.64>Res 31.83>NOTO-29.40> 溶媒对照组28.52。天麻素GAS（100 μm·L-1）、tRes（100 μm·L-1）、三七总皂苷NOTO（100mg·L-1）与溶媒对照组比较，差异有统计学意义，说明天麻素GAS（100 μm·L-1）、白藜芦醇Res（100 μm·L-1）、三七总皂苷NOTO（100 mg·L-1）均能延迟CL4176线虫株瘫痪时间，具有减缓线虫瘫痪，降解Aβ沉积的作用。结论：天麻素等天然产物拮抗CL4176线虫的Aβ表达，具有潜在的拮抗AD 活性。
