%A 武春阳,马佳呈,张楠,等 %T 氨基酸分析仪法批量测定小鼠皮质和海马中氨基酸类神经递质和牛磺酸的含量%0 Journal Article %D 2019 %J 神经药理学报 %R 10.3969/j.issn.2095-1396.2019.05.003 %P 10-16 %V 9 %N 5 %U {http://actanp.hebeinu.edu.cn/CN/abstract/article_654.shtml} %8 2019-10-26 %X

目的:建立一种简单、准确可靠、可批量检测小鼠皮质和海马内氨基酸类神 分析方法。 方法:采用 A300 氨基酸分析仪,使用 10% 磺基水杨酸进行蛋白沉淀,锂盐试剂为流动相,茚三酮显 色,检测波长为 570 nm,对该方法的分离效果、线性范围、检出限及定量限、日内精密度和回收率、日间精密度进 行测定;选择同日龄的 SPF 级 KM 小鼠分为雌雄两组,每组断头处死 3 只,每只均于冰上分离出皮质和海马,经 匀浆、离心、蛋白沉淀、稀释、过膜等过程制成小鼠脑组织游离氨基酸样品,分别测定雌雄小鼠皮质和海马内天冬 氨酸(aspartic acid,Asp)、谷氨酸(glutamic acid,Glu)、甘氨酸(glycine,Gly)、 γ - 氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid,GABA)4 种氨基酸类神经递质的含量和牛磺酸(taurine,Tau)的含量。 结果:标准样品、雌雄小鼠皮质样品 和海马样品中的 5 种目标氨基酸分离度好,在 8~400 μmol·L -1 的浓度范围内,线性良好(R ≥0.999),检测限为 1.29~1.86 μmol·L-1 ,定量限为 4.29~6.20 μmol·L-1 ,日内精密度良好(标准样品相对标准偏差 (relative standard deviation,RSD)<2.23%,脑组织样品 RSD<2.76%),脑组织样品的加标回收率为 91.52%~102.51%,采用绘制标 样峰面积曲线的方法准确获取样品中的 5 种氨基酸含量,实验用雌雄小鼠之间未发现明显统计学差异(P>0.05)。 结论:该方法简便、准确可靠,适用于小鼠皮质和海马组织中游离氨基酸含量的批量检测。

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