α-突触核蛋白对内质网应激及细胞凋亡影响 %0 Journal Article %D 2021 %J 神经药理学报 %R 10.3969/j.issn.2095-1396.2021.02.001 %P 1-4 %V 11 %N 2 %U {http://actanp.hebeinu.edu.cn/CN/abstract/article_680.shtml} %8 2021-04-26 %X

目的：构建α-突触核蛋白（α-synuclein，SNCA）和SNCA突变基因（SNCAmu）过表达转染293T细胞，观察内质网应激及细胞凋亡。方法：应用PCR技术扩增目的基因并插入慢病毒载体质粒，重组质粒的构建及包装293T细胞，转染24 h后用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）的表达。MTT法检测未转染的293T细胞组（CON组）、转染空质粒的293T细胞组（NC组）、转染SNCA基因质粒的293T细胞组（OE组）和转染SNCAmu基因质粒的293T细胞组（OEm组），观察各组细胞病毒转染后不同时间（1、2、3、4、5 d）细胞增殖的情况。Western blotting法测定SNCA和SNCAmu诱导caspase-12的蛋白表达。结果：成功构建了pGC-FU-SNCA-GFP和pGC-FU-SNCAmu-GFP质粒及转染293T细胞，CON组、NC组、OE组和OEm组不同时间的细胞增殖具有统计学意义，SNCA和SNCAmu可能诱导293T细胞caspase-12的蛋白表达。结论：SNCA诱导caspase-12的内质网应激凋亡途径，可能是帕金森病致病机制之一。