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    2017年, 第7卷, 第1期
    刊出日期:2017-02-26
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    专家论坛
    研究论文
    实验方法学
    专题论著
    综述
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    专家论坛
    小分子化合物影响神经干细胞再生的思考
    张力航,殷明
    2017, 7 (1):  1-9.  DOI: 10.3969/j.issn.2095-1396.2017.01.001
    摘要 ( 622 )   PDF(1252KB) ( 546 )  
    近年来有不少研究兴趣聚焦于基于神经干细胞治疗阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)等神经退行性疾病的策略。到目前为止,所谓的再生医学主要集中于用多能胚胎干细胞进行细胞移植治疗。虽然已经有了一些令人激动的研究结果,但胚胎干细胞替代治疗仍然面临一些障碍,包括免疫排斥、突变带来的过度生长、伦理学争论等。代之而起的探索是用小分子化合物直接调制内源性干细胞的命运,已经取得一些结果,但许多涉及神经干细胞与局部小环境的相互作用及神经干细胞特异性信号机制的基础问题有待阐明。对这些问题的研究可能深化对神经干细胞生物学的认识,并促进创新性治疗药物的问世。
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    研究论文
    牡荆苷对脑缺血再灌注大鼠脑损伤保护作用及其机制研究
    杜云广,曹欣欣,王晓茹,王书华
    2017, 7 (1):  10-23.  DOI: 10.3969/j.issn.2095-1396.2017.01.002
    摘要 ( 504 )   PDF(10988KB) ( 255 )  
    目的:本研究旨在探讨牡荆苷对脑缺血再灌注大鼠脑损伤的保护作用及其作用机制。方法:采用Longa 改良线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型。实验随机分为假手术组,模型组,模型+ 依达拉奉阳性对照组(3.24 μmol·kg-1),模型+ 牡荆苷(1.62、3.24、6.48 μmol·kg-1)不同剂量组,大鼠缺血2 h 再灌注1 h 后腹腔注射给药,连续给药时间为1 d 和3 d。2,3,5- 氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazolium chloride,TTC)测大鼠脑梗死体积,干湿重法测脑组织含水量,相应试剂盒法检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、活性氧(reactive oxygen species,ROS)和丙二醛(methane dicarboxylic aldehyde,MDA)含量,免疫组化检测水孔通道蛋白4(aquaporin 4,AQP-4)阳性细胞表达,RTqPCR检测Toll 样受体4 (Toll-like receptor 4,TLR4)和核因子κB(nuclear factor κB,NF-κB)mRNA 表达水平,ELISA 测定肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)含量,HE 染色观察大鼠神经细胞的形态。结果:与假手术组相比,模型组大鼠再灌注后缺血侧脑组织出现明显的梗死灶,含水量明显增多,SOD 活性明显降低,ROS 和MDA 含量明显升高;与模型组相比,给药组大鼠脑组织含水量降低,抗氧化酶活性升高,抗炎作用显著,显著改善脑缺血再灌注大鼠细胞病理形态,在一定剂量范围内,呈剂量依赖性;与依达拉奉对照组相比,牡荆苷中、低剂量组作用较弱(P<0.01,P<0.05);牡荆苷高剂量组与依达拉奉作用相当,差异无显著性。结论:牡荆苷对脑缺血再灌注大鼠脑损伤的保护作用可能是通过抗氧化应激和抗炎作用实现。
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    实验方法学
    大鼠海马神经元及星形胶质细胞的体外培养
    张楠,熊文雯,邢媛,张炜
    2017, 7 (1):  24-28.  DOI: 10.3969/j.issn.2095-1396.2017.01.003
    摘要 ( 413 )   PDF(2017KB) ( 358 )  
    目的:改进大鼠海马神经元、星形胶质细胞及两者混合状态的体外培养方法,获得高纯度的海马神经细胞。方法:选取孕期18~20 d 的SD 大鼠胎鼠作为原代海马细胞培养的材料来源。断头后于冰板上剥离双侧海马,去除表面血管及薄膜,利用眼科剪分离为小块。随后使用冷平衡盐溶液洗涤3 次,将海马组织碎块移入酶消化液中。本方法选择Accutase 和0.1% DNase 作为酶消化液,37 ℃消化 15 min,期间轻柔振动。使用冷平衡盐溶液洗涤3 次,终止消化。0.1% DNase 加入Neurobasal 和B-27 的混合液对消化后的海马组织碎块进行轻柔吹打,获得单细胞悬液。将悬液过200 目筛,进行细胞计数。将过筛的单细胞悬液移入DMEM 培养基(DMEM+10%胎牛血清)中,按照每平方厘米2.5×104 的细胞密度进行接种。经PDL 孵育的塑料片置于培养基底部。细胞于37 ℃、5% CO2 培养箱内培养。4 h 后,依据所需细胞种类的不同,更换相应培养基。海马神经细胞于培养后7~10 d 可用于实验。结果:通过本方法可得到高纯度的大鼠海马神经细胞,且根据实验需求,通过更换培养基,可得到纯神经元、纯胶质细胞及两者混合的三种培养状态。培养的神经元及星形胶质细胞纯度均>98%。结论:该文在传统海马神经细胞体外培养方法基础上,进一步降低了实验操作难度,方法稳定有效。
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    激发时间与哮喘小鼠气道炎症及气道重塑关系的实验研究
    王明磊,王文革,张俊红
    2017, 7 (1):  29-37.  DOI: 10.3969/j.issn.2095-1396.2017.01.004
    摘要 ( 430 )   PDF(11782KB) ( 260 )  
    目的:采用不同激发时间构建小鼠哮喘模型,研究不同激发时间对哮喘小鼠模型气道炎性反应、气道重塑性变化及白介素17(interleukin-17,IL-17)水平的影响。方法:以卵清蛋白(ovalbumin,OVA)作为变应原,采用腹腔注射致敏联合雾化激发的方法制备小鼠哮喘模型。4 周龄的SPF 级BALB/c 小鼠分为激发3 d 组、激发6 d 组和激发12 d 组,每组8 只,分别设置对照组。末次激发24 h 后牺牲小鼠,留取支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF),检测BALF 中IL-17 的水平,计数嗜酸性粒细胞(eosinophilic granulocyte,EOS)百分比及中性粒细胞(neutrophile granulocyte,NEU)百分比;取部分肺组织行病理学切片,HE 染色观察肺组织炎性细胞浸润情况;AB-PAS 染色观察杯状细胞增生及黏液分泌情况;Masson 染色观察气道上皮下胶原沉积及平滑肌增生的情况。结果:4 周龄小鼠激发3 d 后即出现了典型的哮喘气道炎症反应,小鼠肺组织炎症评分、BALF 中NEU% 及EOS% 等炎症指标较对照组明显增加(P?0.01)。激发6 d 后,以上气道炎症指标较激发3 d 组继续增高(P?0.01)。激发12 d 的气道炎症评分及EOS% 虽然高于激发3 d 组,但与激发6 d 组相比差异无显著性(P>0.05)。三组的NEU% 及杯状细胞染色面积/ 管腔基底膜周径(Wag/Pbm)依次增高(P?0.01)。气道周围胶原蛋白沉积厚度(Wcol/Pbm)及气道平滑肌厚度(WAm/Pbm)的增加在激发6 d 后可被观察到,激发12 d 后增生程度更为明显,差异具有统计学意义(P?0.01)。三组小鼠BALF 中IL-17 的水平呈逐渐升高的趋势(P?0.01)。结论:哮喘的发作特点及发病机制具有一定的异质性,不同的激发时间可能导致不同病理表型的哮喘发作。制备哮喘模型用于哮喘研究时,需要根据研究目的的不同合理选择激发时间,以制备出更符合人类哮喘发病规律的小鼠模型。
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    专题论著
    人参皂苷-Rg3 的药理作用研究进展
    苏晓梅,张丹参
    2017, 7 (1):  38-44.  DOI: 10.3969/j.issn.2095-1396.2017.01.005
    摘要 ( 640 )   PDF(916KB) ( 387 )  
    人参是我国传统名贵中药材,药用历史悠久。人参中生理活性的最主要成分是人参皂苷,其中人参皂苷-Rg3 是一种药用价值极高的中药成分,研究其药理作用,可以为人参皂苷-Rg3 的进一步开发和利用提供理论指导。该文以近年来国内外关于人参皂苷-Rg3 的文献为基础,对其药理作用进行总结和分析。文献报道的药理研究表明,人参皂苷-Rg3 具有抗肿瘤、降低化疗药物的心脏毒性和肾毒性、翻转肿瘤细胞对抗癌药物的多药耐药性、保护中枢神经系统和心血管系统、抗疲劳、降血糖、修复创面等广泛药理作用。
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    脂肪因子参与阿尔茨海默病的研究进展
    罗 飘,楚世峰, 陈乃宏
    2017, 7 (1):  45-52.  DOI: 10.3969/j.issn.2095-1396.2017.01.006
    摘要 ( 440 )   PDF(1681KB) ( 334 )  
    阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)又称老年痴呆,是一种最常见的老年中枢神经退行性疾病。其主要病理改变有:神经元外β- 淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)沉积形成的老年斑、神经元内tau 蛋白异常磷酸化形成的神经原纤维缠结以及神经元大量丢失或损伤。近年研究发现,脂肪因子与Aβ沉积、tau 蛋白过度磷酸化以及神经元凋亡之间具有紧密的联系。该文主要针对脂联素(adiponectin,APN)、瘦素(leptin,LP)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)等脂肪因子对AD 的作用机制做一综述,为AD 的临床治疗提供新的思路。
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    综述
    烟碱型乙酰胆碱受体及其相关疾病
    孙志华, 罗素兰
    2017, 7 (1):  53-64.  DOI: 10.3969/j.issn.2095-1396.2017.01.007
    摘要 ( 373 )   PDF(3216KB) ( 351 )  
    烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors,nAChRs)属于配体门控离子通道,广泛分布于中枢神经系统、周围神经系统和肌肉组织非神经系统中,不同的亚基组成形式决定了其对激动剂或拮抗剂不同的亲和力。近期的研究表明,nAChRs 与神经痛、帕金森病、阿尔茨海默病(老年痴呆症)以及小细胞肺癌、乳腺癌、宫颈癌等多种疾病的病理进程息息相关。该文就几种疾病与nAChRs 结构、功能及其二者相关性进行综述,并重点阐述 nAChRs 介导的 α- 芋螺毒素抗肿瘤研究进展,以期为芋螺毒素的抗肿瘤药物的研发提供理论依据。
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